Génotypage par PCR

Identification de Legionella pneumophila et sous-typage à l'aide du typage fondé sur la séquence pour les sérogroupes 1 à 14. S'il s'agit d'un isolat du sérogroupe 1 de L. pneumophila, un panel pour le sous-typage des anticorps monoclonaux est également effectué.

Culture pure.

Entreposer les échantillons à une température se situant entre la température ambiante et 37 ^oC jusqu'à leur envoi pour analyse. Expédier à la température ambiante.

Les géloses BCYE, les géloses en pente et les écouvillons dans un milieu de transport au charbon sont acceptés. Les colonies isolées sur gélose BCYE sont à privilégier.

Entreposer les échantillons à une température se situant entre la température ambiante et 37 ^oC jusqu'à leur envoi pour analyse. Expédier à la température ambiante.

L'expédition des prélèvements doit être confiée à une personne détenant un certificat de formation TMD, conformément au Règlement sur le TMD. Pour plus d'information sur la catégorisation des matières à des fins d'expédition, veuillez consulter la partie 2 de l'appendice 3 du règlement ou la section 3.6.2 du règlement de l'IATA sur les produits dangereux.

Maladie des légionnaires ou fièvre de Pontiac soupçonnée.

Requête d’analyse de bactériologie spéciale dûment remplie, comprenant les renseignements sur le patient et l’information clinique pertinente. Si possible, joindre les résultats des tests de laboratoire effectués par le laboratoire local et/ou provincial.

 

Toutes les données relatives aux antécédents du patient et à l'historique de la souche doivent être fournies. La détection dans le matériel clinique est offerte sur demande spéciale seulement. Obtenir l'approbation du laboratoire pour les cas spéciaux de bactériologie avant d'envoyer les échantillons.

Identification de Legionella pneumophila par immunofluorescence directe (IFD) à l'aide de la trousse MONOFLUO de BioRad et de deux trousses de ProLab Diagnostics (sérogroupes 1 à 14, et sérogroupe 1). La détermination du sérogroupe est effectuée à l'aide de la trousse d'identification par agglutination au latex de ProLab Diagnostics (sérogroupes 1 à 14). Le sous-typage du sérogroupe 1 de L. pneumophila est effectué au moyen du panel d'anticorps monoclonaux de Dresden dirigés contre le LPS de Legionella. Tous les sérogroupes sont ensuite sous-typés par la méthode du typage fondé sur la séquence, qui implique l'amplification et le séquençage de sept gènes cibles, dont certains sous pression variable, aux fins de typage de la souche. Il s'agit d'une adaptation du typage génomique multilocus dans lequel toutes les cibles des gènes sont non sélectives (p. ex. gènes domestiques).

25 jours civils. Par ailleurs, si le personnel ou les ressources sont limités la production du rapport final peut être retardée et le statut de la demande transmis dans un rapport préliminaire. Le rapport final est envoyé lorsque tous les résultats ont été obtenus.

1. Gaia, V., N. K. Fry, B. Afshar, P. C. Luck, H. Meugnier, J. Etienne, R. Peduzzi, and T. G. Harrison. 2005. May. Consensus sequence-based scheme for epidemiological typing of clinical and environmental isolates of Legionella pneumophila. J. Clin. Microbiol. 43:2047-2052
2. Gilmour, M. W., K. Bernard, D. M. Tracz, A. B. Olson, C. R. Corbett, T. Burdz, B. Ng, D. Wiebe, G. Broukhanski, P. Boleszczuk, P. Tang, F. Jamieson, G. Van Domselaar, F. A. Plummer, and J. D. Berry. 2007. Mar. Molecular typing of a Legionella pneumophila outbreak in Ontario, Canada. J. Med. Microbiol. 56:336-341
3. Helbig, J. H., S. Bernander, M. Castellani Pastoris, J. Etienne, V. Gaia, S. Lauwers, D. Lindsay, P. C. Luck, T. Marques, S. Mentula, M. F. Peeters, C. Pelaz, M. Struelens, S. A. Uldum, G. Wewalka, and T. G. Harrison. 2002. 10. Pan-European study on culture-proven Legionnaires' disease: distribution of Legionella pneumophila serogroups and monoclonal subgroups. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 21:710-716
4. Isenberg, Henry D., Clinical Microbiology Procedures Handbook, "Direct Immunofluorescent-Antibody Examination for Legionella spp.," Section 9.5, American Society for Microbiology, 1992
5. Ratzow, S., V. Gaia, J. H. Helbig, N. K. Fry, and P. C. Luck. 2007. Jun. Addition of neuA, the gene encoding N-acylneuraminate cytidylyl transferase, increases the discriminatory ability of the consensus sequence-based scheme for typing Legionella pneumophila serogroup 1 strains. J. Clin. Microbiol. 45:1965-1968
6. Wilkinson, H. W. 1987. Hospital-Laboratory Diagnosis of Legionella infections. Centers for Disease Control, Atlanta, GA.