Détection sérologique des anticorps dirigés contre le virus de la fièvre jaune par PRNT
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Détails de la référence
Détection sérologique d’anticorps neutralisant le virus de la fièvre jaune au moyen du test de séroneutralisation par réduction des plages (PRNT).
- Fièvre jaune
Sérum. Volume minimum requis: 250 mL.
Conserver les échantillons au réfrigérateur jusqu’au moment de leur envoi pour analyse. Expédier les échantillons sur blocs réfrigérants, glace ou glace sèche.
Prélever le sang dans des tubes de séparation du sérum.
Conserver les échantillons au réfrigérateur jusqu’au moment de leur envoi pour analyse. Expédier les échantillons sur blocs réfrigérants, glace ou glace sèche.
Infection par le virus de la fièvre jaune soupçonnée et antécédents de voyage pertinents.
Requête d’analyse pour les zoonoses virales complétée, incluant le nom, l’adresse et le numéro de téléphone du laboratoire expéditeur. Le nom ou l’identificateur (no de référence de l’échantillon) du patient, sa date de naissance, les analyse(s) demandée(s), date de prélèvement de l’échantillon, la date du début des symptômes, ainsi que l’histoire clinique et les antécédents de voyage du patient.
Il ne s’agit pas d’un test de routine. Avant d’expédier les spécimens, veuillez communiquer avec le laboratoire de diagnostic des zoonoses virales. Le test sérologique initial de détection du virus de la fièvre jaune (p. ex. ELISA ou IFA) doit être réactif pour que les échantillons soient soumis au PRNT.
Certaines épreuves de dosage sérologique peuvent donner lieu à d’importantes réactions croisées entre les anticorps dirigés contre des virus du sérocomplexe de l’encéphalite japonaise (EJ) (virus de la dengue, virus de l’encéphalite de Saint Louis, VNO, etc.). Le PRNT étant d’une spécificité analytique accrue, il peut être utilisé pour étayer la présence d’anticorps sériques spécifiques d’un flavivirus donné. Les échantillons sériques sont incubés avec le virus et, si des anticorps viraux neutralisants sont présents, ils seront liés au virus de la dengue et préviendront l’infection virale des cellules de culture, d’où une réduction du nombre de plaques détectées. Le titre neutralisant est exprimé par l’inverse de la dilution du sérum où l’on observe une réduction de 90 % du nombre de plaques détectées. Si le patient a été plus d’une fois la cible d’une infection à flavivirus, une réaction croisée pourrait rendre pratiquement impossible toute interprétation des résultats de cette épreuve, même si elle est plus spécifique.
14 jours civils une fois le test ELISA ou IFA achevés.
- WHO. 2007. Guidelines for plaque reduction neutralization testing of human antibodies to dengue viruses