Protéine 14-3-3 :
Les protéines du liquide céphalo-rachidien humain sont séparées selon leur grosseur par électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de dodécylsulfate de sodium (SDS-PAGE) et transférées par courant électrique sur des membranes de nitrocellulose. Un anticorps primaire réagit avec un déterminant antigénique spécifique trouvé dans les protéines 14-3-3. Les bandes immunoréactives sont détectées par un anticorps secondaire. On obtiendra un résultat positif ou négatif pour l’épreuve en comparant l’intensité des réactions de l’échantillon à un seuil établi par l’intensité des normes internes contenant la protéine 14-3-3 authentique.
Dosage ELISA des protéines Tau totales :
L’analyse des protéines Tau est réalisée par dosage immunoenzymatique (ELISA) en sandwich au moyen de la trousse commerciale Innotest® hTAU Ag (Innogenetics) et par dosage colorimétrique. Les résultats sont exprimés quantitativement, en pg/mL. Aucune norme consensuelle n’a encore été établie pour appuyer l’interprétation des taux de protéines Tau dans le LCR dans le diagnostic de la MCJ. Cependant, une étude prospective sur les caractéristiques de performance, menée entre 2004 et 2010 auprès de patients canadiens que l’on soupçonnait d’être atteints de la MCJ sporadique, a fourni les estimations suivantes à une valeur intermédiaire de 976 pg/mL comme seuil optimal : sensibilité de 0,91 (IC à 95 % : 0,84 à 0,95); spécificité de 0,88 (IC à 95 % : 0,85 à 0,90); rapport de vraisemblance positif de 7,4 (IC à 95 % : 6,9 à 7,8); rapport de vraisemblance négatif de 0,10 (IC à 95 % : 0,06 à 0,20)
4. Les documents à l’appui renferment plus de détails sur l’étude de validation, les caractéristiques de performance et les interprétations possibles.
Dosage ELISA de la protéine S100B :
L’analyse des protéines S100B est réalisée par dosage immunoenzymatique (ELISA) en sandwich au moyen de la trousse commerciale S100 ELISA (Diasorin) et par dosage colorimétrique. Les résultats sont exprimés quantitativement, en ng/mL. Aucune norme consensuelle n’a encore été établie pour appuyer l’interprétation des taux de protéines S100B dans le LCR dans le diagnostic de la MCJ. Cependant, une étude prospective sur les caractéristiques de performance, menée entre 2004 et 2010 auprès de patients canadiens que l’on soupçonnait d’être atteints de la MCJ sporadique, a fourni les estimations suivantes à une valeur intermédiaire de 2.5 ng/mL comme seuil optimal : sensibilité de 0,87 (IC à 95 % : 0,80 à 0,90); spécificité de 0,87 (IC à 95 % : 0,84 à 0,91); rapport de vraisemblance positif de 6,6 (IC à 95 % : 6,1 à 7,1); rapport de vraisemblance négatif de 0,15 (IC à 95 % : 0,09 à 0,20)
4. Les documents à l’appui renferment plus de détails sur l’étude de validation, les caractéristiques de performance et les interprétations possibles.
